+90(533) 652 66 86
nwsa.akademi@hotmail.com
Fırat Akademi Samsun-Türkiye
| Cover Download | Context Page Download |
Hayriye BARAN1 , Perihan GÜLER2 , Mustafa TÜRK3
Russula delica Fr.’nın sitotoksite, apoptik ve nekrotik etkileri incelenmiştir. Kuru basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Sırasıyla primer ve sekonder miseller 27°C’de, karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edildi. Sekonder misellerden 3’er pelet nutrientbroth’da 27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı. Numuneler soxlet cihazında 80°C, %70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitotoksite, apoptik ve nekrotik çalışmalar için hazırlandı. Sitotoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 5mg/ml, 2,5mg/ml, 1.25mg/ml, 0.625mg/ml, 0.315mg/ml olarak uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda 440nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama deneyi ile aynı hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm yapıldı. Toksite, konsantrasyonlara bağlı olarak değişmektedir. 5mg/ml de hazırlanan örnekte toksite oranı yüksektir. 2.5mg/ml altında hazırlanan miktarlar arasında bir fark yoktur. Ayrıca kanser ve normal hücrelerin canlılık değerleri arasında anlamlı bir fark gözlemlenmemiştir.
Keywords
Russula delica,
Kanser,
Sitotoksite,
Apoptik Etki,
Nekrotik Etki,
Hayriye BARAN1 , Perihan GÜLER2 , Mustafa TÜRK3
The cytotoxicity, apoptotic, necrotic effects of Russula delica were investigated. Taken parts from the basidiocarps in the laboratory were developed with tissue culture on malt extract agar. The primary and the secondary mycelium were obtained by incubation at 27°C in the dark for 10 days. Three pellets were taken from the secondary mycelium and were completed their growth in 7 days at 140rpm at 27°C in nutrient broth. The samples were prepared for cytoksite, apoptotic, necrotic studies by extracting at 80°C and 1 hour in ethyl alcohol at soxlet device. In cytotoxic studies, sample concentrations for extract MCF-7 and L929 fibroblast cells were applied as 5mg/ml, 2.5mg/ml, 1.25mg/ml, 0.625mg/ml, 0.315mg/ml respectively. The WST-1 solution was added and the absorbance was measured in a microplate reader at a wavelength of 440nm at the end of the incubation. Apoptosis and necrosis were detected in the same cell line as the double staining experiment. Binary staining solution was prepared and MCF-7 and L929 Fibroblast cells were applied at the same concentrations. As a result of incubation, the measurement was done at fluorescence microscopy at 20X magnification in FITC and DAPI filters. Toksite varies depending on concentrations. The sample prepared at 5mg/ml has a high toxicity ratio. There is no difference between the amounts prepared under 2.5mg/ml. There was no significant difference between the viability values of cancer and normal cells.
Keywords
Russula delica,
Cancer,
Cytotoxicity,
Apoptotic Effects,
Necrotic Effect,
|
Authors |
|
|||||||||||
|
|
||||||||||||
|
Supporting Institution |
: | |||||||||||
|
|
||||||||||||
|
Project Number |
: | |||||||||||
|
|
||||||||||||
|
Thanks |
: | |||||||||||