Authors |
|
|||||||||||
|
||||||||||||
Supporting Institution |
: | |||||||||||
|
||||||||||||
Project Number |
: | |||||||||||
|
||||||||||||
Thanks |
: |
Cover Download | Context Page Download |
Ferit ARPAZ1 , Perihan GÜLER2 , Mustafa TÜRK3
Çalışmada, Suillus collinitus’un sitotoksite, apoptik ve nekrotik etkileri incelenmiştir. Kuru basidiokarplardan alınan parçalar malt ekstrakt agarda doku kültürü yöntemiyle geliştirildi. Sırasıyla primer ve sekonder miseller 27°C’de, karanlıkta, 10 gün süreyle inkübe edilerek elde edildi. Sekonder misellerden 5’er pelet nutrient broth’da 27°C’de, 140 rpm’de 7 günde gelişimini tamamladı.Numuneler soxlet cihazında 80°C, %70’lik etil alkolde 1 saat ekstraksiyon edilerek sitoksite, apoptik ve nekrotik çalışmalar için hazırlandı. Sitoksite çalışmalarında, ekstrakt MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere örnek konsantrasyonları 1mg/ml, 0.5mg/ml, 0.25mg/ml olarak uygulandı. WST-1 solüsyonu eklenerek inkübasyon sonucunda 440 nm dalga boyunda mikroplate okuyucuda absorbans ölçümü yapıldı. İkili boyama deneyi ile aynı hücre hattında apoptoz ve nekroz belirlendi. İkili boyama solüsyonu hazırlanarak MCF-7 ve L929 Fibroblast hücrelere aynı konsantrasyonlarda uygulandı. İnkübasyon sonucunda florasanataçmanlı mikroskop FITC ve DAPI filtresinde 20X büyütmede ölçüm yapıldı. Toksite, konsantrasyonlara bağlı olarak değişmektedir. 0.5mg/ml konsantrasyonda %86 oranında toksik etki göstermiştir. Konsantrasyon azaldıkça toksite de azalmıştır. Fibroblastlara yapılan uygulamada ise uygulanan tüm konsantrasyonlarda toksik etki göstermediği tespit edilmiştir.
Keywords
Suillus collinitus,
Kanser,
Sitotoksite,
Apoptik Etki,
Nekrotik Etki,
Ferit ARPAZ1 , Perihan GÜLER2 , Mustafa TÜRK3
In the study, cytotoxicity, apoptotic, necrotic effects of Suillus collinitus were investigated. Taken parts from the dry basidiocarps were developed by tissue culture method on malt extract agar. The primary and the secondary mycelium were obtained by incubation at 27°C in the dark for 10 d. Five pellets were taken from the secondary mycelium and were completed their growth in 7 d at 140 rpm at 27°C in nutrient broth. The samples were prepared for cytotoxic, apoptotic, necrotic, studies by extracting at 80°C and 1 h in ethyl alcohol at soxlet device. In cytotoxic studies, sample concentrations for extract MCF-7 and L929 fibroblast cells were applied as 1mg/ml,0.5mg/ml, 0.25mg/ml respectively. The WST-1 solution was added and the absorbance was measured in a microplate reader at a wavelength of 440 nm at the end of the incubation. Apoptosis and necrosis were detected in same cell line as the double staining experiment. Binary staining solution was prepared and MCF-7 and L929 fibroblast fibroblast cells were applied at the same concentrations. As a result of incubation, the measurement was done at fluorescense microscopy at 20X magnification in FITC and DAPI filters. Toksite varies depending on concentrations. At toxicity of 0.5mg/ml showed 86% toxic effect. As concentration decreased, toxicity decreased. In application to fibroblasts, it was determined that it does not show any toxic effect at all applied concentrations.
Keywords
Suillus collinitus ,
Cancer,
Cytotoxicity,
Apoptotic Effects,
Necrotic Effects,
Authors |
|
|||||||||||
|
||||||||||||
Supporting Institution |
: | |||||||||||
|
||||||||||||
Project Number |
: | |||||||||||
|
||||||||||||
Thanks |
: |